CurieCoreTech Recombinant Protein

The Protein Production and Purification Facility is a core service and resource to overcome the major bottleneck in recombinant protein expression and purification. Mainly we provide advice and active support for researchers scientific community in the use of the procaryotic and eukaryotic expression system for recombinant protein production.

Activité

Les protéines sont des éléments essentiels à la vie de la cellule. Les protéines recombinantes sont produites au laboratoire par une bactérie ou  par des cellules eucaryotes (Levure, cellules d’insectes ou mammifères), dont le matériel génétique a été modifié. Elles peuvent être ensuite purifiées et utilisées en recherche pour comprendre les mécanismes complexes des fonctions cellulaires ou en thérapies.

La plateforme technologique de production de protéines recombinants a été créée en 1997. Elle a pour mission d’accompagner les différentes équipes de recherche de l’Institut Curie dans le développement de projets de production de protéines recombinantes et d’anticorps. Elle est également ouverte aux collaborations avec différents laboratoires académiques.
La plateforme a développé plusieurs systèmes d’expression de protéines recombinantes en utilisant différents types de cellules : Bactérie E.coli, levures, cellules de mammifères et cellules d’insectes/baculovirus. Toute protéine peut présenter des difficultés particulières en terme de quantité obtenue, de stabilité ou de solubilité, qui peuvent être des éléments essentiels à l’activité de cette protéine. Le savoir faire acquis depuis plusieurs années a permis de mener à bien plus d’une centaine de projets de production de différentes protéines (protéines sécrétées, nucléaires, membranaires.)
Aussi l’optimisation des séquences de gènes à produire est une étape essentielle dans la réussite du projet. Pour cela nous avons développé plusieurs combinaisons de vecteurs d’expression. Ces outils de génétiques associés à l’optimisation des conditions de culture cellulaire nous ont permis de faire aboutir plusieurs projets de production.
L’ensemble des systèmes d’expression optimisés (vecteurs, cellules) sont mis à disposition des équipes de recherche et des laboratoires académiques.
Les personnes utilisant nos outils pour leurs expériences s’engagent à citer la plateforme de l’Institut Curie dans les remerciements de leur publication.

Mission

The Protein Expression Facility is a fee-for platform dedicated to providing technical assistance in the following areas:

• Advices and training
• Recombinant DNA engineering
• Recombinant protein expression in bacteria and yeast
• Recombinant protein expression via baculovirus expression systems (BVES)
• Recombinant protein expression in Mammalian cells
• Protein purification
• Polyclonals antibodies production

Services

The platform possesses expertise to produce and to purify any type of protein. For each project we used the following flowchart:

• Primer design and expression vector cloning
• Strains development
• Expression screening
• Production and purification

Other Services

• Preparation and distribution of recombinant expression vector
• New Vector development to provide state-of-the-art expression technologies
• Maintenance of frozen stocks of recombinant baculovirus
• Protein purification technology development
• Development of recombinant protein and molecular biology enzymes catalogue

Equipments

Fermenter for cell culture and protein production
Chromatography system: for protein purification
Cell Disruption: proteins extraction
Insect cell culture for protein production
Hybridoma system production
Akta flux for sample concentration

Network and collaboration

P4EU: (Protein Production and Purification Partnership in Europe) network initiative

Collaboration with Recombinant Platform facility of Institut Pasteur

Training

The facility functions as a training centre for students and scientists in gene cloning and Recombinant protein production.